1. Kandaki endotoksini belirlerken, yöntem ve reaktif seçimine dikkat edin.

2. Plazma veya serumun hazırlanması

Yaygın bir klinik numune olarak, plazma ana numunedir ve kullanım oranı %95'in üzerindedir. Bu nedenle plazmanın vücut sıvısının ana parçası olarak hazırlanması çok önemlidir. Das'a göre endotoksin genellikle serbest durumuna ek olarak trombositlere bağlanır, bu nedenle numune olarak çok sayıda trombosit içeren plazmanın kullanılması daha uygundur. Şu anda insan plazması veya hayvan plazması hazırlanırken, hücre hasarını önlemek için, yabancı ülkeler çoğunlukla çok sayıda trombosit içeren plazma numuneleri kullanarak, yani 4 ℃ 1000gx10 dakika ayırma koşullarında veya 3000gx40'ta düşük sıcaklıkta ayırma kullanırlar. Düşük sıcaklıkta santrifüj olmadığında saniye ayırma koşulları. Normal sıcaklıklarda yüksek hızlı ve uzun süreli ayırma yapılmasına izin verilmez. Ayrıca plazma veya serum ayrıştırılırken bakteriyel kontaminasyondan kaçınılmalıdır.

Serumun hazırlanması: kanı toplamak için antikoagülansız bir şırınga kullanın ve bir santrifüj tüpüne aktarın ve santrifüjleme için 10 dakika 4 ℃, 1000xg'de 30 dakika buzlu su banyosuna yerleştirin.

Plazma veya serum ayrıldıktan sonra geçici olarak kullanılmayacaksa -80 ℃'de dondurulabilir ve 1 ay içinde kullanılabilir. Not Endotoksinin adsorpsiyonunu önlemek için lütfen saklama için bir cam test tüpü kullanın.

3. Antikoagülan türleri ve etkileri

Plazmanın hazırlanması sırasında, bazı antikoagülanların eklenmesi nedeniyle, antikoagülanların türü ve miktarı, iyileşme oranı üzerinde büyük etkiye sahiptir. Genel olarak, yaygın olarak kullanılan antikoagülanlar, heparin, sodyum sitrat ve EDTA'yı içerir ve aralarında en yaygın kullanılanı heparindir. Bununla birlikte, büyük miktarda heparinin, özellikle seyreltme ısıtma yöntemi ve kloroform ekstraksiyon yöntemi için endotoksin reaksiyonuna müdahale edeceğini biliyoruz, bu da geri kazanım oranını azaltacak, ancak PCA yöntemi üzerinde daha az etkiye sahip olacak, bu nedenle eklenen heparin miktarı ve plazma hazırlama sırasında salınan sadece 2~5 μ L/ml yeterlidir.