1. Numune ekleme: Numune seyreltmesini kaplanmış plakaya ekleyin, serumu PBS veya salin içinde 1:20 oranında seyreltin ve ardından mikroplakanın reaksiyon kuyucuklarına 10 ul ekleyin.

2. Kontrol ilavesi: 3 kuyulu negatif kontrol, 1 kuyulu pozitif kontrol ve 100 ul kontrol serumu.

3. İnkübasyon: Örneği iyice karıştırmak için reaksiyon plakasını çalkalayın ve ardından 37 °C'lik bir inkübatöre veya 20 dakika su banyosuna yerleştirin.

4. Yer yıkama: 15 ml yıkama solüsyonunu 300 ml'ye distile su ile seyreltin. Elle yıkarken, reaksiyon plakası havasının içeriği dışarı dökülmeli ve yıkama sıvısı ile dolu deliğe yerleştirilmeli ve ardından şiddetli bir şekilde çalkalanmak üzere 30°C'ye kadar bekletilmelidir. Bu işlemi 5 kez tekrarlayın ve kurulayın. Makinenin 5 kez gerçekleştirmesi gerekir. Her kuyucuğa 200ul yıkama solüsyonu enjekte edilebilir veya doldurulabilir, ardından 30 dakika bekletilip kurutulabilir.

5. Enzim etiketli çalışma solüsyonu ekleyin: 37 °C'lik bir inkübatördeki her kuyucuğa 100ul enzim etiketli çalışma solüsyonu ekleyin ve 20 dakika sonra plakayı beş kez yıkayın. Yıkama plakası adım 4'teki ile aynıdır.

6. Bu, reaksiyonun renk gelişimi ve reaksiyonun sonlandırılması ile son aşamasıdır: reaksiyon kuyucuğuna 50ul substrat eklenir ve renk, karanlıkta 37 °C'de 10 dakika boyunca geliştirilir. Her kuyudaki çözelti durduruldu ve reaksiyonu sonlandırmak için karıştırılır. Mikroplakaların kullanımı steril koşullar altında yapılmalıdır. Kullandıktan sonra plakaları dikkatlice dezenfekte edin ve temizleyin, ancak bazı plakaların yüksek sıcaklıklarda sterilize edilip edilemeyeceklerini görmek için talimatları dikkatlice okuması gerektiğini unutmayın.